乙酰化位点鉴定


乙酰化位点鉴定适合研究乙酰化位点初步定性,适合SDS-PAGE或者IP互作溶液样本。
乙酰化修饰与蛋白活性调控紧密相关;大部分研究发现非组蛋白乙酰化发生在赖氨酸残基,这种修饰对于影响mRNA稳定,蛋白定位,相互作用以及降解过程扮演重要角色。更有趣的是,这些非组蛋白乙酰化与肿瘤发生,癌细胞增殖,免疫效应还有关。

近年来随着质谱技术不断进步与发展,蛋白乙酰化这种重要的蛋白翻译后修饰逐渐被揭开神秘的面纱。通常在乙酰基转移酶的催化下,蛋白在转录过程或后转录过程中发生乙酰化修饰,此乙酰基集团可以被连接在氨基酸的N端,也就是N-乙酰化;或者连接在氨基侧链的赖氨酸残基上

N-乙酰化:

N-乙酰化是真核生物蛋白修饰中最多见的蛋白修饰,85%哺乳动物蛋白,60%酵母蛋白都发现此修饰,但是在原核生物钟很少发现此种修饰。大部分实验表明N-乙酰化通常发生在丝氨酸,丙氨酸和苏氨酸的N端残基上,并且此修饰发生过程中有几种不同的N-乙酰基转移酶参与,随后执行不同分子功能。(如下图)

赖氨酸(Lysine)乙酰化修饰:

赖氨酸残基发生乙酰化是一个可逆的过程,而且是转录相关过程中染色质蛋白的重要修饰,通过乙酰化修饰影响蛋白之间相互作用和蛋白与DNA的相互作用;在组蛋白乙酰化和去乙酰化过程中,对赖氨酸N末端进行修饰从而影响基因调控;

除组氨酸修饰之外,还有很多非组蛋白的赖氨酸残基发生乙酰化。赖氨酸(Lys)乙酰化修饰异常可能引起各种疾病,包括癌症,糖尿病,心血管疾病以及神经退行性疾病等。

 当然赖氨酸残基不仅可以发生乙酰化修饰,还可以发生甲基化、泛素化和SUMO化修饰。因此,赖氨酸残基被不同的酶催化会发生如下的翻译后修饰,如下图所示。