二硫键质谱分析


二硫键是蛋白内部半胱氨酸残基形成的蛋白翻译后修饰,这共价键的形成来自半管氨酸的自由巯基集团,主要是由酶催化形成,例如蛋白二硫键异构酶和内质网氧化还原酶-1,二硫键是蛋白结构中重要组成部分,确保蛋白适当折叠,保持稳定和正常发挥功能。

二硫键的作用

 三级结构:二硫键确保蛋白正常的折叠;他们能够使蛋白形成正确的结构亚型,能够稳定更高级别的构象以确保能行使正常的生物功能。  四级结构:二硫键对蛋白行使正常功能起决定性作用,二硫键的还原能够引起某些蛋白活性的改变。

既然二硫键在生物体中如此重要,科研工作者们也需要更为高效的方法进行检测分析。有几种常用方法可以对二硫键进行定位,包括核磁共振,X射线晶体分析,Edman降解,以及大部分科研工作者采用的高效液相串联质谱方法。

AIMS提供的是高效专业的蛋白二硫键定位服务,有专业的HPLC-MS/MS质谱平台,可以分析各种真核生物和原核生物样本。

服务流程:

选择酶切方式

注意:避免在样本准备过程中的二硫键自然生成。  2个半胱氨酸残基之间反应  1个半胱氨酸和1个二硫键之间反应  2个已经形成二硫键的半胱氨酸之间发生的反应 提示:温度,PH,和自由半胱氨酸残基都有可能影响真实结果。